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顯微鏡景深的計(jì)算方法

日期： 2019-04-12

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景深在照相時(shí)是指成像畫面內(nèi)近處物體與遠(yuǎn)處物體之間的距離，如果在一張照片內(nèi)近處的景物與遠(yuǎn)處的景物都很清晰說明景深大。照相機(jī)的景深可以根據(jù)照片需要展現(xiàn)的效果做適當(dāng)調(diào)整。顯微鏡一般都是垂直向下取景的，通過視場直徑內(nèi)觀察到的物體表面凸起的位置與凹下的位置都能夠看的很清楚時(shí)，那么凸點(diǎn)與凹點(diǎn)之間的高度差就是景深了，對于顯微鏡來說景深越大越好，景深越大在觀察高低不平整的物體表面時(shí)，能夠得到更好更立體的清晰度畫面。

顯微鏡的景深計(jì)算方法

顯微鏡的景深計(jì)算方法

景深表示,象平面上清晰的象所對應(yīng)物平面的前后空間的深度：

d_tot=(λ_*n)/NA + n/(M?NA) * e

例：40.5um?=（0.55um * 1）/0.1 + 1/(4*0.1)*14um?(這里取中間值14um)

注：這里以4x物鏡為例

公式中：

d_tot：景深
NA?：數(shù)值孔徑
M?：總放大率
λ：光波波長, （通常λ=0.55um）

n?: 試樣與物鏡之間介質(zhì)的折射率（空氣: n=1、油: n=1.515）

e?:?可分辨的最小距離，檢測器被放置在顯微鏡物鏡的像面，其橫向放大率是?M（e一般是4um、5um、6um......24um）

顯微鏡的景深計(jì)算方法

物鏡	4X	10X	40X	100X
數(shù)值孔徑	0.1	0.25	0.65	1.25

數(shù)值孔徑（N.A.）計(jì)算公式

數(shù)值孔徑是判斷物鏡性能（分辨率、焦深和亮度）的關(guān)鍵要素。

數(shù)值孔經(jīng)(N.A.)以下式計(jì)算。

N.A.=n×sinθ

n=試樣與物鏡之間介質(zhì)的折射率（空氣: n=1、油: n=1.515）

θ: 光軸與離物鏡中心最遠(yuǎn)的折射光形成的角度。

顯微鏡的視野亮度（B）由與物鏡倍率（M）相關(guān)的下式求出。

數(shù)值孔徑（N.A.）越大，物鏡倍率越低，則以孔徑、倍率的平方

值亮度會(huì)增加。

B?∝?N.A.²/ M²

數(shù)值孔徑

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