TB菌因細胞璧富含脂質,因此能抵抗鹽酸酒精的脫色。
TB Stain結核菌染色液為化學染色劑,主要用于對結核桿菌等抗酸性菌的化學染色。抗酸染色一般有二種常用方法:1)鹼性復紅法(Ziehi-Neelsen法);2)螢光染色金胺O法(也稱為金胺O-羅丹明法)。本染劑系應用的方法原理改良而成,染色過程不必加熱。
結核菌、麻瘋桿菌等抗酸性菌,因其菌體表面有一層類脂或脂質之皮膜不易著色,但一經著色后,酸及乙醇的作用亦是不容易把它脫色。利用此特性并以增強的染色予以染色,然后再以酸及乙醇加以處理,使其脫色后對比染色,此時抗酸性菌仍是固定著最初染上的顏色(紅色),也就易于監別。
結核菌染色液 試藥內容:
1. Carbolfuchsin x 1 ?250ml(碳酸復紅溶液)
2. Acid Alcohol x 2 ?250ml(酸性酒精)
3. Counter Stain x 1 ?250ml(復染劑)
操作方法:
1. 涂片經火焰固定,加碳酸復紅溶液于涂片上,染色10min。(不需加溫步驟 )
2. 放冷后,水洗。(水洗之后,盡可能將水份瀝乾或以濾紙吸干)。
3. 加酸性酒精脫色2min。
4. 水洗。(假設標本面還可以看到殘存紅色時,再添加酸性酒精至完全脫掉紅色為止)。
5. 加復染劑染色10~30秒,水洗、干燥、鏡檢。
結果判定:
抗酸性菌(為結核菌)呈紅色,其它細菌及細胞呈藍色。
結核菌長1.3~3.5μm,寬0.3~0.5μm,有點彎曲之桿菌,沒有鞭毛和芽孢,屬難染性菌,但抗酸性染色可顯著被染色。